بیش از 300 نوع پروتئین در پلاسما وجود دارد که نقش های مختلفی در انعقاد خون، نقل و انتقال،کوره ازمایشگاهی سیستم ایمنی، تثبیت فشار اسمزی خون و غیره دارند. اختلال در تولید پروتئین ها می تواند تهدید کننده سلامتی فرد باشد. زیرا کاهش و یا افزایش غلظت پروتئین خون می تواند نشان دهنده بروز بیماری می باشد. به کمک تکنیک الکروفورز پروتئین های خون به 5 دسته اصلی گلوبولین آلفا 1، آلفا 2، گاما، بتا و آلبومین تقسیم می شوند.
از آن جا که تغییر در غلظت پروتئین خون می تواند هشداری برای سلامت فرد باشد، انجام این آزمایش بسیار مهم است. در ادامه با این پروتئین ها و نحوه انجام تست به وسیله تجهیزات و دستگاه های مورد نیاز بیشتر آشنا می شویم.
توتال پروتئین به دو دسته کلی پروتئین های آلبومین و گلوبولین گفته می شود که پروتئین های اصلی تشکیل دهنده خون انسان می باشند.
غلظت طبیعی توتال پروتئین در سرم انسان بالغ 6 تا 8 g/dl و در کودکان 5 تا 7 g/dl می باشد.
اگر سطح غلظت پروتئین خون از حد طبیعی بالا تر یا پایین تر بیاید، می تواند نشان دهنده نقص هایی در ارگان های مختلف بدن باشد.
یکی از واکنش های مورد استفاده برای تشخیص وجود پروتئین، پیوند های پپتیدی و غلظت پروتئین خون در نمونه واکنش بیوره می باشد. اساس این واکنش بدین گون هاست که یون مس دو ظرفیتی در حضور ترکیبات حاوی پیوند پپتیدی در محیط قلیایی کمپلکس بنفش رنگی ایجاد می کند. در واقع در این آزمایش، ترکیب مورد نظر باید 2 یا بیشتر از 2 پیوند پپتیدی داشته باشد.
با استفاده از کیت تعیین غلظت توتال پروتئین سرم و مطابق با دستورالعمل درج شده برروی کیت می توانید این تست را به راحتی انجام دهید. کیت های استاندارد آزمایشگاهی تعیین غلظت پروتئین خون را می توانید از مراکز معتبر فروش تجهیزات آزمایشگاهی و پزشکی تهیه کنید.
برای انجام آزمایش اندازه گیری غلظت خون سه محلول بلانک، استاندارد و مجهول مورد نیاز است. روش تهیه هر کدام از این محلول ها در جدول زیر درج شده است.
| محلول بلانک | محلول استاندارد | محلول تست | |
| استاندارد | – | 20 میکرولیتر | – |
| سرم | – | – | 20 میکرولیتر |
| معرف R 1 | 1000 میکرولیتر | 1000 میکرولیتر | 1000میکرولیتر |
| معرف R 2 | 250 میکرولیتر | 250 میکرولیتر | 250 میکرولیتر |
ابتدا برای آماده سازی لوله بلانک 1000 میکرولیتر از معرف R1 و 250 میکرولیتر از معرف R2 به لوله اضافه کرده و باهم مخلوط کنید. دستگاه اسپکتروفتومتر را بر روی طول موج 546 نانومتر تنظیم کنید و با محلول بلانک دستگاه را صفر کنید.برای آماده سازی لوله استاندارد، 20 میکرولیتر از محلول استاندارد و 1000 میکرولیتر از معرف R1 را با هم مخلوط کرده و پس از گذشت 5 دقیقه، جذب اولیه لوله استاندارد را از روی دستگاه اسپکتروفتومتر یادداشت کنید. سپس 250 میکرولیتر از معرف R2 را به لوله آزمایش اضافه کرده و مجددا پس از گذشت 5 دقیقه جذب ثانویه را از روی دستگاه یادداشت کنید.
برای آماده سازی لوله تست، 20 میکرولیتر از سرم به همراه 1000 میکرولیتر از معرف R1را در لوله آزمایش ریخته و با یکدیگر مخلوط کنید. پس از گذشته 5 دقیقه جذب اولیه لوله تست را روی دستگاه مشاهده و یادداشت کنید. سپس 250 میکرولیتر از معرف R2 به لوله اضافه کنید، 5 دقیقه صبر کرده و جذب ثانویه را از روی دستگاه یادداشت کنید.
اختلاف جذب اولیه و ثانویه را بدست آورده و در غلظت استاندارد توتال پروتئین ضرب کنید(gr/dl 6) تا غلظت محلول توتال پروتئین بدست آید.
نتایج آزمایش های بیوشیمی در پیشگیری و درمان بسیاری از بیماری ها می توانند تعیین کننده باشند. بنابراین استفاده از تجهیزات مناسب، به روز و از همه مهم تر کالیبره در آزمایشگاه ها نقش مهمی دارند.
پس از انجام معاینات بالینی، دندانپزشک به شما می‌گوید که آیا به سینوس لیفت نیاز دارید یا خیر. ایمپلنت اقساطی در رشت همچنین ممکن است دندانپزشک به شما پیشنهاد کند که یک اسکن سه بعدی CBCT برای ارزیابی کامل وضعیت فک خود انجام دهید. اسکن‌های سه‌بعدی CBCT بطور گستره و جامع، فک و دهان را بررسی می‌کنند. این نوع از اسکن‌ها می‌توانند ضخامت و تراکم استخوان به اضافه عمق استخوان نزدیک کانال‌های عصبی و حفره‌های سینوسی را اندازه‌گیری کنند. تمام این اطلاعات در یک نمای سه بعدی به دندانپزشک شما ارائه می‌شود.
بسته به پیچیدگی روش درمانی که نیاز دارید، ممکن است لیفت سینوس خود را در مطب تحت بی‌حسی موضعی یا تحت بیهوشی انجام دهید. اگر به روش پیچیده لیفت سینوس نیاز باشد، به عنوان مثال اگر نیاز باشد که برای پیوند از استخوان لگن بیمار استفاده شود، این عمل باید در بیمارستان و با بیهوشی عمومی انجام شود.
پیوندهای کوچک استخوان و لیفت سینوس معمولا در مطب و تحت بی‌حسی موضعی انجام می‌شود. در این صورت و با تشخیص دندانپزشک خود، می‌توانید بلافاصله پس از جراحی پیوند استخوان به خانه بروید. اگر پیوند استخوان یا لیفت سینوس گسترده‌تری را در بیمارستان انجام داده‌اید و تحت بیهوشی عمومی قرار گرفته‌اید، به چند ساعت زمان نیاز دارید تا بهبودی کامل را پیدا کنید و سپس به خانه بروید. توجه داشته باشید که در حالت دوم حتما یک همراه قابل اعتماد داشته باشید تا شما را تا خانه همراهی نماید.
زمانی‌که تاثیر داروی بیهوشی از بین می‌رود، ممکن است کمی احساس ناراحتی و درد داشته باشید. این میزان درد و ناراحتی اگر طبیعی باشد، باید بتوان با مسکن‌های بدون نسخه مانند پاراستامول و ایبوپروفن آن را مدیریت کرد. ممکن است دندانپزشک آنتی‌بیوتیک‌هایی را برای جلوگیری از عفونت تجویز کرده باشد که مصرف آن‌ها نیز مهم است.
اگر جراحی لیفت سینوس با موفقیت انجام شده باشد، باید بتوانید روز بعد از عمل به سر کار بروید و به طور کلی به روال عادی زندگی خود بازگردید.
روز اول پس از جراحی لیفت سینوس، از خوردن و آشامیدن نوشیدنی‌های گرم یا غذاهای گرم خودداری نمایید. هنگام نوشیدن نیز سعی کنید مایعات را روی ناحیه آسیب دیده نریزید و از نی هم استفاده نکنید. این مراقبت‌ها به حفظ لخته خون در اطراف پیوند کمک می‌کند و باعث می‌شود جای جراحی عفونت نکند.
طبیعی است که بعد از این نوع جراحی مقداری خونریزی داشته باشید. اما اگر خونریزی شما بیش از حد بود، مقداری گاز روی آن ناحیه قرار داده و به مدت ۳۰ دقیقه آن را گاز بگیرید. اگر خونریزی متوقف نشد، بلافاصله برای مشاوره بیشتر با دندانپزشک خود تماس بگیرید.
برای اطمینان از اینکه محل پیوند استخوان یا لیفت سینوس شما با موفقیت بهبود یابد در ادامه برخی از بایدها و نبایدهای کلیدی در هنگام بهبودی پیوند استخوان یا لیفت سینوس آورده شده است:
داشتن مقداری تورم و کبودی در ناحیه اطراف محل پیوند استخوان یا لیفت سینوس در ۷۲ ساعت اول کاملا طبیعی است. با قرار دادن یک کیسه یخ کوچک به مدت ۱۰ دقیقه می‌توان این تورم را به حداقل رساند.
سعی کنید دهان خود را تا حد امکان تمیز نگه دارید اما از مسواک زدن روی ناحیه آسیب دیده خودداری کنید. دندانپزشک شما ممکن است دهانشویه‌ای را نیز توصیه کرده باشد که می‌توانید سه یا چهار بار در روز از آن استفاده کنید تا به تمیز نگه داشتن ناحیه کمک کند.
در هفته اول پس از درمان باید از غذاهای نرم مانند ماست، سوپ و فرنی استفاده کنید. پس از هفت روز، می‌توانید به رژیم غذایی معمولا خود بازگردید، اما سعی کنید فشار زیادی به محل ناحیه آسیب دیده وارد نکنید.
اگر بخیه‌هایی زده‌اید، دندانپزشک شما یک جلسه حدود هفت تا ۱۰ روز پس از پیوند استخوان یا لیفت سینوس‌تان تعیین می‌کند تا این بخیه‌ها کشیده شود.
سپس باید منتظر بمانید تا ناحیه تحت جراحی به طور کامل بهبود یابد و قبل از کاشت ایمپلنت با استخوان فک شما جوش بخورد. این اتفاق از فردی به فرد دیگر متفاوت است اما معمولا بین سه تا نه ماه طول می‌کشد.
شما باید معاینات منظمی با دندانپزشک خود داشته باشید تا مطمئن شوید که ناحیه بخوبی بهبود یافته است. دندانپزشک شما معمولا به شما توصیه می‌کند که به طور منظم به یک متخصص بهداشت نیز مراجعه کنید تا به تمیزی دهان شما تا حد امکان کمک کند.
گاهی اوقات، ممکن است پس از جراحی پیوند استخوان یا لیفت سینوس عوارضی وجود داشته باشد. در صورت بروز هر یک از موارد زیر با دندانپزشک ایمپلنت خود تماس بگیرید:
اگر هر یک از این علائم بالا را تجربه کردید، در اسرع وقت برای مشاوره بیشتر با دندانپزشک خود تماس بگیرید.
ایمپلنت‌ها بوسیله جراحی، در استخوان فک شما جوش داده می‌شوند. این بدان معناست که برای موفقیت جراحی و بهبودی مناسب، باید استخوان کافی در اطراف ایمپلنت وجود داشته باشد. با افزایش سن، اندازه حفره سینوس ما نیز افزایش می‌یابد و به مرور استخوان‌ها تحلیل می‌روند. این اتفاق همچنین ممکن است پس از یک تصادف شدید یا دندانی که با دشواری کشیده شده است یا اگر بیماری لثه دارید و کیست یا توموری را برداشته‌اید، رخ دهد. تمامی این احتمالات به این معنی است که ارتفاع مناسبی از استخوان برای کاشت ایمپلنت‌های دندانی در فک بالا وجود ندارد.
اگرچه ممکن است ظاهرا جراحی ترسناکی به نظر برسد، اما لیفت سینوس یک روش نسبتا رایج است و البته فقط توسط یک دندانپزشک یا جراح مجرب انجام می‌شود. اگر در مورد این روش احساس اضطراب شدید دارید، به دندانپزشک خود اطلاع دهید تا بتواند برای شما آرامبخش تجویز کند.
هزینه لیفت سینوس بستگی به پیچیدگی روش، اندازه پیوند مورد نیاز و مواد استفاده شده دارد. هنگامی‌که دندانپزشک شما یک برنامه درمانی را به شما توصیه کرد، هزینه‌های درمان را به طور واضح به شما ارائه خواهد داد.
در آزمایشگاه ها عموما با توجه به محصولات تهیه شده، روش های آزمون مختلفی برای بررسی خواص فیزیکی، مکانیکی و یا شیمیایی مواد شیمیایی در نظر گرفته می شود.کوره ازمایشگاهی اسپکتروسکوپی مرئی- فرابنفش با نام اختصاری UV-Vis از ساده ترین روش ها با کاربرد های متعدد است. پاسخ دهی سریع، دقیق و ارزان تر بودن نیز از مزایای طیف سنجی UV-Vis هستند که منجر می شود محققان در اولین آنالیز ها به سراغ این تکنیک بروند. از آن جایی که این نواع طیف سنجی فقط به صورت محلول انجام می شود، آماده سازی نمونه برای طیف سنجی UV-Vis بسیار مهم است. زیرا نتایج به دست آمده از این آنالیز مستقیما از غلظت محلول نمونه تاثیر می پذیرد. در صورتی که محلول سازی به دقت انجام نشود، در نتیجه آزمایش با خطا مواجه خواهید شد.
در این مقاله به زبان ساده نحوه آماده سازی نمونه برای طیف سنجی UV-Vis و نکات مهم آن گردآوری شده است. ادامه این مقاله را به هیچ عنوان از دست ندهید.
هدف از این مقاله ارائه کامل تئوری طیف سنجی فرابنفش – مرئی نیست. اما با توجه به این که بسیاری از کاربران این روش آنالیز ممکن است با علم شیمی آشنایی نداشته باشند، به توضیح مختصری درباره اساس این روش آنالیز می پردازیم.
مواد شیمیایی مختلف وقتی مقابل تابش نور با طول موج مشخص قرار می گیرند، مقداری انرژی جذب می کنند. طول موجی از نور که بیشترین جذب در آن اتفاق می افتد برای هر ماده شیمیایی منحصر به فرد است. λmax که علامت اختصاری بیشترین طول موج است، از اسپکتروسکوپی UV-Vis به دست می آید. با استفاده از این پارامتر و قرار دادن آن در فرمول های ویژه سایر پارامتر ها مانند غلظت ماده شیمیایی مجهول را به دست آورید.
امواج فرابنفش تا مرئی با طول موج حدودی 190 تا 900 نانومتر دارای انرژی هستند. وقتی نمونه ای قصد آنالیز آن را دارید، مقابل این تابش قرار می گیرد، الکترون های آن تهییج می شوند. به بیان ساده تر الکترون ها انرژی حاصل از این تابش را دریافت می کنند و با رفتن به مدار الکترونی بالاتر، انرژی آن های بیشتر می شود. اما الکترون ها طاقت تحمل این ارتعاش بالاتر را ندارند و با از دست دادن انرژی دوباره به مدار پایین باز می گردند.
حال ممکن است این سوال پیش آید که اگر الکترون های تحریک شده، انرژی خود را از دست می دهند، پس چگونه می توان مقدار اختلاف انرژی تابیده شده و خارج شده را محاسبه کرد و به طول موج جذب شده رسید؟ پاسخ به این سوال ساده است الکترون ها می توانند بیشتر از یک سطح انرژی تحریک شوند. در مقابل این امکان وجود دارد که با از دست دادن انرژی دقیقا به سطح انرژی اولیه باز نگردند. در این حالت است که مقداری از انرژی تابیده شده جذب می شود. بنابراین اختلاف طول موج نور تابیده شده و خروجی صفر نخواهد بود.
نتیجه ای که دستگاه طیف سنج UV-Vis به شما می دهد معمولا به صورت نموداری بر اساس طول موج بر حسب جذب است. اما شما می توانید با تفسیر این نمودار داده های مورد نیاز خود را به دست آورید.
آماده سازی نمونه برای طیف سنجی UV-Vis در دقت نتایجی که به دست می آورید کاملا تاثیرگذار است. اگر محلول سازی به دقت انجام شود، در صورت مواجه با خطا، می توانید اطمینان داشته باشید که خطاهای دستگاهی باعث کاهش دقت آزمایش شده اند.
در ادامه نکات مهم آماده سازی نمونه برای UV-Vis بررسی می شوند:
قبل از شروع آزمون حتما با استفاده از محلول بلنک (blank)، اصطلاحا دستگاه را صفر کنید. محلول بلنک محلولی است که هیچ گونه ماده شیمیایی جاذبی ندارد بنابراین دستگاه باید جذب صفر را نشان دهد. انحراف از صفر نشان دهنده عوامل زمینه ای است که با فشردن دکمه بلنک از نتایج شما حذف می شود تا فقط جذب نمونه را بخوانید. برای این کار معمولا از آب مقطر یا دو بار تقطیر شده استفاده می کنند.
خط مبنا یا baseline در این آزمون بسیار مهم است. در اندازه گیری بیس لاین تمام پارامتر های فیزیکی و شیمیایی از جمله حلال و سایر مواد شیمیایی در محلول و کووت یکسان است و فقط نمونه مجهول یا مورد آزمایش حذف می شود. با این کار انحرافات ناشی از کووت، حلال، دستگاه و .. از نتیجه نهایی حذف خواهد شد.
اگر نمونه اصلی محلولی با غلظت بالا است، حتما با استفاده از فرمول C1V1 = C2V2 محلول را طی چند مرحله رقیق سازی کنید. در این فرمول C1 غلظت محلول اصلی (mol/L or mmol/mL or mol/ mL )، C2 غلظت محلول رقیق شده، V2 حجمی از محلول رقیق شده که می خواهید بسازید (برحسب لیتر، میلی لیتر یا میکرولیتر) و V1 حجمی از محلول غلیظ که باید بردارید تا رقیق سازی کنید.
در این فرمول توجه داشته باشید که V1 مجهول است. حتما واحدهای پارامترها در دو طرف معادله یکسان باشند. پاسخ این معادله حجم مور نیاز از محلول غلیظ است. این حجم را با استفاده از میکروپیپت کالیبره شده اندزه گیری کنید و در بالن حجمی با استفاده از آب مقطر به حجم برسانید. پس از تکان دادن محلول و یکنواخت کردن آن می توانید از محلول استفاده کنید.
با توجه به این که دقیق ترین روش اندازه گیری حجم مایعات در آزمایشگاه استفاده از سمپلر است، اگر در فرمول از واحد لیتر استفاده می کنید، عدد به دست آمده را ضرب در 10-6 کنید تا حجم بر حسب میکرولیتر به دست آید.
ساترن بلاتینگ یا Southern Blotting یک روش آزمایشگاهی است که به کمک آن می توان توالی های DNA خاص را در یک نمونه شناسایی کرد. این روش به نام مخترع آن، زیست شناس بریتانیایی ادوین ساترن که اولین بار این روش را در سال 1975 ابداع کرد، گرفته شده است.ساخت و نصب سکوبندی ازمایشگاهی ساترن بلات اغلب در آزمایش های زیست شناسی مولکولی برای کاربردهایی مانند اندازه گیری قطعه های DNA، تشخیص وجود یا عدم وجود یک توالی خاص DNA، آنالیز بیان ژن و سایر آزمایش های ژنتیکی و بیماری های ارثی مورد استفاده قرار می گیرد.
در این پست، اصول ساترن بلات، دستورالعمل کاملی از نحوه انجام آن، تجهیزات آزمایشگاهی مورد نیاز و مقایسه این تکنیک با سایر بررسی می شوند.
روش ساترن بلاتینگ بر مبنای جداسازی فرگمنت های DNA با استفاده از الکتروفورز ژل روی ژل آگارز انجام می شود. در ادامه DNA به صورت بلات یا لکه روی غشایی از جنس نایلون یا نیتروسلولز منتقل می شود. سپس از یک پروب DNA یا RNA نشاندار شده که مکمل توالی DNA هدف است. پس از هیبرید شدن پروب با توالی هدف می توان از اتورادیوگرافی، فلورسانس یا کمی لومینساسن برای تشخیص پروب تارگت استفاده کرد.
تکنیک ساترن بلاتینگ شامل 9 مرحله است. این مراحل عبارتند از استخراج DNA از نمونه، آنزیم هضم محدود کننده، الکتروفورز ژل، دناتوره کردن DNA، انتقال به غشا، پری هیبریداسیون یا بلاکینگ، هیبریداسیون، شست و شو و دتکت کردن یا تشخیص و آنالیز نهایی. در ادامه به ترتیب نحوه انجام هرکدام از این مراحل و تجهیزات و دستگاه های مورد نیاز شرح داده می شود.
در اولین مرحله باید DNA از نمونه در دسترس را به دست آورید بافت یا سلول ها انجام می شود. با این روش DNA با جرم مولکولی بالا به دست می آید. همچنین نمونه DNA به دست آمده به وسیله استخراج از دناتوره شدن آن جلوگیری می کند.
اندونوکلئازهای محدود کننده برای برش رشته‌های DNA با وزن مولکولی بالا به قطعات کوچکتر استفاده می‌شوند. همیشه به خاطر داشته باشید که مقادیر بافر، آنزیم و زمان های لازم برای انکوباسیون را طبق دستورالعمل های شرکت های سازنده انجام دهید.
PCR تعداد قطعات DNA به دست آمده از هضم محدود را که به راحتی با استفاده از الکتروفورز ژل جدا می شوند، تقویت می کند.
برای جداسازی قطعات DNA براساس اندازه، نمونه DNA دایجست شده با آنزیم روی ژل معمولا آگارز یا پلی آکریل آمید لود و سپس الکتروفورز انجام می شود. ژل ها با اتیدیوم بروماید رنگ آمیزی می شوند تا امکان تصویربرداری در زیر نور UV فراهم شود.
DNA به دست آمده به صورت دو رشته ای است. از محلول های بازی برای دناتوره کردن قطعات محدود کننده در ژل استفاده می شود که DNA دو رشته ای را به تک رشته تبدیل می کند. هر گونه RNA باقیمانده را که ممکن است هنوز در DNA وجود داشته باشد از بین می برد. برای جلوگیری از هیبریداسیون مجدد، از NaCl استفاده می کنیم تا DNA خنثی شود. دناتوره شدن در یک محیط بازی پیوند DNA با بار منفی را به یک غشای با بار مثبت بهبود می بخشد.
اگر قطعات DNA بزرگ تر از 15 kb باشند، قبل از بلات کردن ممکن است لازم باشد ژل آغشته به HCl شود. اسید کمک می کند تمام قطعات DNA خارج کند و DNA را به قطعات کوچکتر می شکند. بنابراین انتقال کاملا موثر انجام می شود.
ورقه ای از جنس نتیروسلولز یا نایلون در قسمت بالایی یا پایینی ژل (با توجه به جهت انتقال) قرار می گیرد. برای اطمینان از تماس خوب و یکنواخت بین ژل و غشا، فشار به طور یکنواخت به ژل اعمال می شود. برای انتقال DNA از ژل به غشا از بافر استفاده می شود. انتقال بافر طبق اصل کپیلاری از ناحیه ای با پتانسیل آب بالا به ناحیه ای با پتانسیل آب کم (معمولاً کاغذ صافی و غشا نیتروسلولزی) انجام می شود. DNA و غشا می توانند با یکدیگر پیوند یونی برقرار کنند. زیرا DNA دارای بار منفی و غشا دارای بار مثبت است.
سپس غشا باید داخل آون آزمایشگاهی یا آون خلا برای مدت 2 ساعت در دمای 80 درجه سانتی گراد قرار گیرد. البته قرار دادن غشا در معرض تابش UV باعث می شود لکه سریع تر تثبیت شود.
در پروسه انجام ساترن بلاتینگ مرحله بلاکینگ بسیار مهم است. زیرا در این مرحله پیوندهای غیر اختصاصی به غشا کاهش پیدا می کند. محلول پری هیبریداسیون را آماده کرده و نمونه DNA را اضافه کنید. بلات را از کراس لینک جدا کرده، محلول پری هیبریداسیون را اضافه کرده و انکوبه کنید.
پروب که در واقع یک قطعه DNA با توالی خاص (رشته DNA مکمل) است، به DNA هدف هیبرید می شود. پروب با استفاده از رنگ لورسنت، ترکیب رنگزا یا ماده رادیواکتیو برچسب گذاری می شود. قبل از انکوباسیون غشا، محلول پروب را با بافر هیبریداسیون رقیق کنید.
پروب هایی که پیوندی تشکیل نداده اند با استفاده از باقر شست و شو از غشا خارج می شوند.
پس از شست و شو، غشا در معرض مواد شیمیایی خاصی قرار می گیرد. به این ترتیب به کمک رادیوگرافی با اشعه ایکس (اتورادیوگرافی)، کمی لومینساس یا فلورسانس سیگنال ها قابل تشخیص خواهند بود. اگر از روش تشخیص کروموژنیک استفاده شود، می‌توانیم شاهد ایجاد رنگ بر روی غشا باشیم.
قانون تجارت ، مسئولیت تهیه ، ثبت شرکت تدوین و تنظیم روابط تجاری و اقتصادی جامعه را بر عهده دارد .
وقتی عده ای می خواهند فعالیت های خود را در قالب شرکت های تجاری انجام دهند بایستی:
اولاَ: با انواع شرکت ها و مزایا و معایب آن ها آشنایی داشته باشند.
ثانیاَ: با اطلاع از وظایف و اختیارات و نحوه انتخاب مدیران شرکت و تشریفات خاص قانونی،جهت به ثبت رساندن شرکت های مزبور اقدام کنند؛ در غیر این صورت با مشکلات متعددی روبرو خواهند شد.
جهت آشنایی با قانون تجارت ، می توانید به مقالات متعدد در سایت های مختلف مراجعه نمایید و یا از مشاوره و راهنمایی متخصصین در این رابطه کمک بگیرید.
طبعاَ هزینه های ثبت یک شرکت بیش از هزینه های شروع به فعالیت به صورت شخصی است که باعث برخی تردیدها جهت فعالیت به صورت حقوقی می شود.
با این همه ، استفاده از پدیده شرکت تجاری به بازدهی فعالیت اقتصادی حدت بیشتری می دهد و متضمن مزایایی است که فعالیت فردی در بر ندارد، مزایایی چون فراهم شدن سرمایه بیشتر و تجمع تخصص هایی گوناگون برای دستیابی به هدفی واحد و به ویژه محدودیت مسئولیت فعالان تجاری.
لذا ، پس از مدتی فعالیت مفید ، سود کسب شده ناشی از اقدامات تجاری صحیح و اصولی ، هزینه های اولیه خدمات ثبت شرکت را ( که مبلغ چندانی نیست ) پوشش خواهد داد.
یکی از موارد الزامی در خدمات ثبت شرکت ، ارائه آدرس مکانی به عنوان آدرس شرکت است . مطلوبیت و تناسب محل کسب و کار که در نهایت به ازدحام و رفت و آمد مردم منجر می شود تاثیر زیادی بر موقعیت محل و میزان مشتری گیری آن دارد. یک طرفه یا دو طرفه بودن خیابان ، وجود یا عدم وجود ایستگاه های حمل و نقل عمومی ، پارکینگ و ...از جمله عوامل تاثیرگذار محسوب می شوند که می تواند در ابتدای راه مانعی جهت ثبت شرکت باشد.
اگرچه در صورت نداشتن یک دفتر مستقل در ابتدای امر می توان از آدرس منزل استفاده کرد.اما در مرحله تشکیل پرونده دارایی ، می بایست آدرس یک مکان تجاری با سند یا اجاره نامه به نام شرکت ارائه داد.
اما راهکارهایی در این زمینه وجود دارد : نخست همان طور که در موارد فوق ذکر شد در سه ماهه ابتدای پس از ثبت ، شرکت ها می توانند با آدرس منزل مسکونی خود نیز فعالیت نمایند و پس از طی مدت مذکور امکان و لزوم تغییر آدرس به آدرسی تجاری جهت ارائه به دارایی وجود دارد.
دوم اینکه ابتدائاَ لزومی به آغاز به کار در ملکی کامل به عنوان دفتر شرکت نیست و با اجاره یک اتاق از یک شرکت تجاری و ارائه اجاره نامه آن به اداره دارایی و اعلام آدرس مذکور می توان شرکت را بدون مشکل و با هزینه های کمتر اداره نمود.
طبق قوانین کار، شرکت ها موظف به بیمه نمودن کارکنان خود مطابق قانون خواهند بود و طبعاَ کارفرما علاوه بر پرداخت حقوق ماهیانه ، موظف به پرداخت درصدی از حق بیمه کارمند خود خواهد بود که هزینه ای اضافه بر سایر هزینه ها بر شرکت تحمیل خواهد نمود.
در این رابطه لازم به یادآوری است که کارفرمای خصوصی نیز همانند کارفرمای حقوقی ملزم به پرداخت حقوق و بیمه کارکنان است و در این مورد تفاوتی وجود ندارد.
هر شرکتی موظف به تکمیل دفاتر تجاری پلمپ شده و اظهار آن به اداره دارایی در پایان هر سال مالی خواهد بود.ضمناَ تصویب نامه مورخ 27 آبان ماه 1340 شرکت های تجاری را موظف نموده است که ترازنامه و حساب سود و زیان خود را در پایان هر سال در روزنامه رسمی کشور منتشر نمایند. لذا ، تجار و شرکت های تجاری می بایست هر سال ترازنامه عملیات خود را تنظیم کنند.
برخلاف تصور برخی این موضوع نیاز به تخصص خاصی نداشته و کافی ست مواردی چون درآمدها ، هزینه ها ، بدهی ها ، استهلاکات و ... در دفتر ثبت گردد.
در مورد مراحل دریافت سالانه دفاتر پلمپ شده از اداره دارایی نیز روال اداری ساده ای وجود دارد که در صورت عدم آشنایی با این روال یا کمبود وقت ، می توان انجام آن را به موسسات خدمات ثبت شرکت که چنین خدماتی انجام می دهند سپرد.
مالیات سهمی است که بموجب اصل تعاون ملی و بر وفق مقررات ؛هر یک از سکنه ی کشور موظف است جهت تامین هزینه های عمومی و حفظ منافع اقتصادی یا سیاسی یا اجتماعی کشور بقدر قدرت و توانایی خود به دولت بدهد.کلیه ی شرکت ها و موسسات تجاری و انتفاعی که مراحل قانونی در اداره ی ثبت شرکت ها را طی نموده و به ثبت رسیده اند و دارای شماره ی ثبت می باشند مشمول مالیات بر درآمد بوده و موظف به پرداخت مالیات تعیین شده هستند، در غیر این صورت از تسهیلات و مزایا و معافیت های قانونی که برای آن ها در نظر گرفته شده محروم خواهند شد وضمانت های اجرایی و مجازات مربوطه نیزاعمال می گردد . لذا پس از ثبت شرکت و موسسه ، شرکت ها می بایست بلافاصله نسبت به تعیین حوزه ی مالیاتی اقدام نمایند و گرنه مسئول جرائم قانونی خواهند شد.لازم به توضیح است حتی در صورتی که شرکت فعالیتی هم ندارد باز هم موظف است تشکیل پرونده دهد.
https://danasabt.ir/%D9%BE%D9%84%D9%85%D9%BE-%D8%AF%D9%81%D8%A7%D8%AA%D8%B1/