الکتروفورز ژل آگارز

اساس تکنیک الکتروفورز ژل آگارز

بر اساس قوانین فیزیک وقتی جریان الکتریکی به محیطی شامل گونه های باردار مثبت و منفی اعمال می شود، کوره ازمایشگاهی انتظار می رود گونه ها به سمت بار مخالف خود حرکت کنند. این قانون ساده که همه ما با آن آشنایی داریم، اساس تکنینک الکتروفورز ژل آگارز است. این روش در علوم زیستی به طور گسترده استفاده می شود.

در ادامه این مقاله با تعریف الکتروفورز آگارز، چگونگی عملکرد و کاربرد های آشنا خواهید شد.

الکتروفورز ژل آگارز چیست؟

 برای بستر ژل آگارز مناسب است، برای جداسازی قطعات نوکلوئیک اسید، DNA و RNA، استفاده می شود. روی طسح آگارز منافذی وجود دارد. پس از لود نمونه حاوی DNA یا RNA روی ژل آگارز و اتصال جریان الکتریکی به آن، این مولکول ها که دارای بار منفی هستند، به سممت قطب مثبت مهاجرت می کنند.

مولکول های آگارز با کنار هم قرار گرفتن، منافذ سه بعدی را ایجاد می کنند. بنابراین نوکلوئیک اسید هایی که تحت جریان الکتریکی قرار گرفته اند، بر اساس اندازه تفکیک خواهند شد. در واقع مولکول های کوچک تر سریع تر حرکت می کنند و مولکول های بزرگ تر در منافذ گیر می افتند. به این ترتیب نوار هایی از نوکلوئیک اسید ها طبق اندازه آن ها روی ژل ایجاد می شود. این نوار ها را با استفاده از تابش فرانبفش (UV) می توان مشاهده و تحلیل کرد.

هنگامی الکتروفورز در حال انجام می باشد به مرور دمای محیط پایه و بافرها  افزایش می یابد که منجر به تبخیر حلال می گردد، این اثر سبب صعود بافر از هر دو بخش بافری به درون محیط پایه می گردد، این جریان دو طرفه بر حرکت یون ها تأثیر می گذارد.

چگونگی عملکرد الکتروفورز ژل آگارز

آگارز یک پلی ساکارید است که معمولا از برخی جلبک های دریایی قرمز استخراج می شود. مولکول های آگارز به صورت بسیار درهم پیچیده با پیونده های هیدروژنی کنار یکدیگر قرار گرفته اند. از بین کانال ها و منافذ ایجاد شده، مولکول های دیگری می توانند عبور کنند.

آگارز به صورتی پودری سفید رنگ است که در ترکیب با آب، پیوند های هیدروژنی بین مولکول ها تشکیل می شود. هنگامی که ژل آگارز گرم شود، پیوند ها شکسته و به مایع تبدیل می شود. دوباره می توان آن را داخل قالب ریخت.

درصد آگارز موجود در یک ژل بر اندازه منافذ و در نتیجه اندازه مولکول‌هایی که ممکن است از آن عبور کنند و سرعت عبور آنها تأثیر می‌گذارد. هرچه درصد آگارز بیشتر باشد، اندازه منافذ کوچک‌تر است، بنابراین مولکول‌ها کوچک‌تر می‌توانند عبور کنند و مهاجرت کند تر می‌شود. در آزمایشگاه های زیستی، ژل آگارز 0.7-1٪ معمولاً برای جداسازی DNA روزانه استفاده می شود، که تمایز خوب و واضح قطعات را در محدوده 0.2-10 کیلوبایت ارائه می دهد.

مولکول هایی که با الکتروفورز ژل آگارز تفکیک می شوند، مانند DNA، با چشم غیر مسلح قابل مشاهده نیستند. بنابراین هنگام ست کردن آن ها روی ژل از ترکیبات رنگی مانند اتیدیوم بروماید (EtBr) استفاده می شوند. مولکول های این رنگ به DNA متصل می شوند. با قرار گرفتن در معرض تابش UV خاصیت فلورسانس پیدا می کنند. هر چه DNA بیشتر باشد، نوار روشن‌ تر می‌شود.

نمونه های مخلوط شده با رنگ روی یک انتهای ژل آگارز ست و در بافر غوطه ور می شوند. سپس یک جریان الکتریکی توسط الکترودهای هر انتهای مخزن ژل، از ژل عبور می کند. پس از این که به اندازه کافی مهاجرت انجام شد، با استفاده از نور UV و اندازه گیری های لازم، می توان نتایج الکتروفورز را تحلیل کرد.

مراحل تهیه ژل آگارز

  1. قالب ژل را آماده کنید.
  2. شانه ای با دنده های مناسب روی قالب قرار دهید.
  3. حجم ژل مورد نظر را تعیین کنید (اندازه گیری طول و عرض قالب و قطر ژل مورد نظر)
  4. پودر آگارز را وزن کنید.
  5. آگارز را در بافر حل کنید و آن را حرارت داده تا خوب بجوشد و قبل از خنک شدن به ازای هر ۱۰ میلی لیتر ژل یک میکرولیتر از محلول اتیدیوم بروماید اضافه کنید سپس آن را مخلوط کرده و داخل قالب بریزید.
  6. بعد از بسته شدن ژل آن را از قالب خارج کرده و داخل تانک الکتروفورز قرار دهید.

الکتروفورز ژل آگارز چه کاربردی دارد؟

  • الکتروفورز ژل آگارز را می توان برای جداسازی مولکول ها بر مبنای بار یا وزن مولکولیشان استفاده نمود. مولکول هایی که بار الکتریکی بیشتری دارند، تحرک یا مهاجرت بیشتری از خود نشان می دهند و سریع تر منتقل می شوند.
  • آگارز برای جداسازی اسید نوکلئیک ها و پروتئین های خیلی بزرگ استفاده می شود.
  • برای جداسازی بر اساس بار، ژل آگارز مناسب است.
  • معمولا برای تفکیک قطعات بزرگ  (DNA  بزرگتر از 500 جفت باز) درصورتی که هدف صرفا بررسی کیفی و تفکیک باشد، استفاده از ژل آگارز انتخاب اول است .
  • یکی از مهمترین کاربردهای الکتروفورز ژل آگارز جداسازی بخش های حاصل از برش DNA با آنزیم های محدود کننده است.
  • ژل آگارز می تواند پروتئین ها را بر اساس اندازه و بار تفکیک کند. (DNA و RNA دارای بار منفی هستند در حالی که بار پروتئین ها با توجه به آمینواسید های ساختار مشخص می شود.)

الکتروفورز ژل آگارز چه تفاوتی با پلی آکریل آمید دارد؟

  • برای استفاده ژل آگارز باید از الکتروفورز عمودی استفاده شود. در حالی که الکتروفورز افقی مناسب آکریل آمید است.
  • ژل آگارز به خاطر اندازه بزرگ منافذ، قدرت جداسازی و تفکیک پایین تری نسبت به اکریل آمید برای DNA دارد، اما دامنه جداسازی آن بسیار وسیع تر است.
  • ژل آگارز نسب به آکریل آمید منافذ بزرگ تری دارد. بنابراین پلی آکریل آمید که منافذ کوچک تری دارد، وضوح بهتری از تفکیک پروتئین ها کوچک می دهد.
  • تهیه ژل آگارز به مراتب سریع تر، آسان تر و کم هزینه تر از ژل پلی آکریل آمید می باشد.

سرمایه گذاری و ثبت شرکت در ایتالیا

ایتالیا،معروف به کشور چکمه ای شکل است که جایگاه چهارمین اقتصاد بزرگ اروپا و هشتم جهان از لحاظ تولید ناخالص داخلی را دارا است. پلمپ دفاتر 1403 حجت الاسلام والمسلمین دکتر حسن روحانی،در نشست مشترک هیات های عالی رتبه ایران و ایتالیا،خاطر نشان کرد:امروزه زمینه های لازم برای تحرک بیشتر در روابط تهران-رم فراهم شده که می بایست با بهره گیری از ظرفیت های موجود،در راستای تعمیق و تحکیم روابط و همکاری های دو کشور تلاش کنیم.


رییس جمهوری،انتخاب ایتالیا به عنوان نخستین مقصد سفر اروپایی خود پس از برجام را نشان دهنده اهمیت ایتالیا برای ایران در روابط با کشورهای خارجی و اتحادیه اروپا دانست و با تاکید بر تلاش در راستای اجرایی و عملیاتی شدن اسناد و توافقنامه های موجود میان دو کشور،گفت:امروز بستر لازم برای توسعه مناسبات تجاری،اقتصادی،فرهنگی و علمی میان دو کشور فراهم شده و روابط دوستانه و صمیمانه ایران و ایتالیا پشتوانه ای برای توسعه مناسبات همه جانبه میان دو کشور است.
همه ساله از سراسر جهان تعداد زیادی از متقاضیان سرمایه گذاری و کارآفرینی،پرونده های سرمایه گذاری خود را به سفارت های این کشور ارسال می نمایند.چنانچه شما نیز علاقه مند به سرمایه گذاری در این کشور هستید ،قبل از هر چیز می بایست به  قوانین سرمایه گذاری در این کشور آشنایی کامل داشته باشید بدین منظور،توجه علاقه مندان به سرمایه گذاری در ایتالیا را به مطالعه ی نوشتار ذیل جلب می نماییم.

  • وضعیت حقوقی سرمایه گذاری تاجر خارجی در  ایتالیا

کشور ایتالیا به عنوان یکی از اعضاء اتحادیه ی اروپا _بر اساس ماده 16 قانون 1942 ایتالیا _از اصل رفتار متقابل برای خارجیان اعم از شخص حقیقی و حقوقی پیروی کرده است.هدف از این قانون حمایت از مهاجران ایتالیایی بود که در اواخر قرن 19 و اوایل قرن 20 به طور وسیعی به کشورهای دیگر نقل مکان کرده بودند و اعتقاد بر این بود که با توجه به رفتار متقابل از حقوق مهاجران می توان به نحو بهتری دفاع نمود.
الف-رعایت اصل رفتار متقابل و نحوه اجرای آن
در قانون مدنی ایتالیا در مورد وضعیت حقوقی بیگانگان اعم از شخص حقیقی و حقوقی امروزه اصل بر نفی و انکار حقوق مدنی آنان بوده ولی در موارد استثنایی در صورت وجود رفتار متقابل این اصل ملایم تر گشته است.از طرفی دیگر،در مورد مسائل مهم اقتصادی و مالکیت گاهی محدودیت ها و موانعی علیرغم رفتار متقابل وجود دارد.
فرد خارجی که قصد اشتغال به کار در ایتالیا را دارد اول باید ویزای ورود به ایتالیا را دریافت نماید.متعاقباَ وزارت کشور و امور خارجه شرط رفتار متقابل مندرج در ماده 16 را بررسی می نماید و سپس به فرد خارجی در ایتالیا اجازه کار داده می شود.اثبات وجود رفتار متقابل به عهده فرد بیگانه است و کنترل این امر در صلاحیت وزارت امور خارجه می باشد که از طریق نمایندگان سیاسی خود در خارج از کشور اقدامات لازم به عمل می آورد.پس از طی تحقیقات لازم،وزارت کشور اجازه اقامت دائم را بنابر تقاضای فرد خارجی اعطا می کند.البته به موجب بخش نامه وزارتی،برای شهروندان ژاپنی و آمریکایی تسهیلات ویژه ای در نظر گرفته شده و در مورد مشاغل مهم از قبیل مهندسین،حسابرسان و ماموران بیمه و نیز برای حرفه های پزشکی و دامپزشکی و داروسازی رعایت شرط متقابل الزامی است.شایان ذکر است در مشاغلی که با منافع عمومی ایتالیا ارتباط دارد مانند سردفتری،بازرسی،وکالت،صرافی و حسابرسی رسمی به بیگانه اجازه اشتغال داده نمی شود.بر اساس پیمان 24ژوئن 1975 که از سال 1981 اجرا گردیده کارگران ایتالیایی و کارگرانی که جزو کشورهای عضو جامعه اقتصادی اروپا نمی باشند از حقوق برابر برخوردار هستند و اعطای این حقوق برای رعایت موازین انسانی و همکاری بین المللی است و این کارگران دارای حق استفاده از خدمات اجتماعی،مدارس و داشتن مسکن و حفظ هویت فرهنگی خویش نیز می باشند و به طور کلی کارگران خارجی می توانند با کسب اجازه کار از مقامات محلی و داشتن ویزا به کار اشتغال ورزند.در صورت اخراج دسته جمعی و فردی یا استعفای کارگران خارجی تدابیر ویژه ای جهت حمایت از آنان پیش بینی شده و ملزم به خروج از ایتالیا نمی باشند ولی به کارگیری و استخدام مخفی و پنهان کارگر خارجی برای کارفرمایان متخلف مجازات هایی را در پی خواهد داشت.قوانینی راجع به وضع کارگر خارجی برای کارفرمایان متخلف مجازات هایی را در پی خواهد داشت.قوانینی راجع به وضع کارگر غیر قانونی تنظیم گردیده و قانون 28 فوریه 1990 به نام قانون مارتلی(نام وزیر کشور وقت ایتالیا) قواعد اضطراری راجع به پناهندگی سیاسی و ورود و اقامت غیر قانونی اشخاصی را که از شهروندان جامعه اقتصادی اروپا نیستند پیش بینی کرده است.ملاحظه می شود که این قانون بر اساس تبعیض نژادی تهیه گردیده و مجازات های سنگینی برای افرادی که مهاجرت های غیر قانونی را تدارک می بینند پیش بینی نموده است ولی باز هم امکان بررسی و پذیرش کارگری که به طور غیرقانونی وارد ایتالیا شده است وجود دارد.
ب-نحوه فعالیت فرد خارجی در امور تجاری
فعالیت بازرگانی در آب های ساحلی و فلات قاره ایتالیا محدود به اتباع ایتالیا و خارجیانی است که تابعیت ایتالیا را کسب نموده اند.در مورد شرکت های مالی و بانک ها محدودیت هایی برای تجار خارجی در نظر گرفته شده است.در مورد شرکت ها،حداقل دو سوم اعضای هیات مدیره و رئیس و مشاور باید ایتالیایی باشند.بانک های خارجی چنانچه بخواهند در ایتالیا شعبه ای افتتاح نمایند باید موافقت وزارت خزانه و امور خارجه را کسب نمایند و مجوز،پس از مشورت کمیته مشترک صادر می گردد و شرکت های بیمه خارجی نیز مجوز خود را از وزارت صنایع دریافت می نمایند.ماهی گیری در دریای ساحلی مخصوص شهروندان و قایق های ایتالیایی می باشد مگر آنکه در معاهدات بین المللی در این خصوص استثنایی وجود داشته باشد.
در اصل 16 قانون اساسی ایتالیا،از نظر اقامه دعوا و آیین دادرسی مدنی برای بیگانگان و اتباع ایتالیایی حقوق یکسانی پیش بینی شده است و بند اول ماده 24 همان قانون نیز حقوق بیگانگان را برای دسترسی به مقامات قضایی پیش بینی و تعیین می نماید،ولی قبل از اعمال حقوق مذکور رفتار متقابل کشور متبوع خارجی مورد کنترل و بررسی مقدماتی قرار می گیرد.
اما به هر حال تساوی در حقوق یاد شده استثناء هم دارد.به طور نمونه،ماده 98 آیین دادرسی مدنی ایتالیا فرد خارجی را مکلف می کند که مبلغی به عنوان وثیقه جهت هزینه دادرسی به مراجع صالحه بسپارند.ضمناَ معاضدت قضایی برای ایتالیایی و بیگانگان به طور یکسان پذیرفته شده و برای افرادی که به زبان ایتالیایی آشنایی ندارند استفاده از مترجم در جریان دادرسی های مدنی و کیفری پیش بینی شده است.
نتیجه آنکه،می توان گفت که در ایتالیا همانند اغلب نظام های حقوقی معاصر تمایل به شناسایی شخصیت حقوقی شرکت های بیگانه وجود دارد و به این منظور،پیمان های بی شماری با کشورهای مختلف تنظیم گردیده است.شناسایی شخص حقوقی از طریق محل تاسیس آن یا مرکز شرکت صورت می گیرد اما در برخورد با شرکت های مزبور اصل رفتار ملی یا اصل ارجحیت در برخورداری از حقوق ملی مورد توجه قرار می گیرد.
قانون 31 مه 1995 در ماده 25 خود محل تاسیس شرکت را مورد قبول قرار داده است و انجمن ها و هرنوع موسسات خصوصی و عمومی را نیز شامل می گردد اما در بعضی موارد برای شرکتی که در خارج از ایتالیا تاسیس یافته می توان قانون ایتالیا را اعمال نمود،به شرط آنکه مقر چنین شرکتی در ایتالیا واقع شده یا فعالیت اصلی در ایتالیا انجام پذیرد.

  • ثبت شرکت در ایتالیا

ایجاد و ثبت شرکت در ایتالیا تحت قوانین مقررات اتاق بازرگانی امکان پذیر می باشد.ثبت شرکت در ایتالیا از طرق الکترونیکی و مراجعه حضوری به ادارات ثبت ایتالیا و ارائه مدارک لازم انجام پذیر می باشد.
مدارک مورد نیاز جهت ثبت شرکت در ایتالیا به شرح ذیل می باشند:
-درخواست فرم ثبت و تکمیل درخواست الکترونیکی(درخواست الکترونیکی از طریق سامانه اتاق بازرگانی امکان پذیر است)
-شرکت نامه
-اساسنامه
-بیمه های ضروری
-فهرستی از نام ها و آدرس های اعضا و سهامداران،میزان مالیات بر رارزش افزوده،میزان معین مالیات

  • انواع شرکت ها در ایتالیا

بر اساس قوانین ایتالیا شرکت های ذیل قابلیت ثبت را دارند.لذا به عنوان اولین اقدام جهت تاسیس شرکت ،می بایست در رابطه با انتخاب نوع شرکت خود تصمیم بگیرید.
1-شرکت مسوولیت محدود
در این نوع شرکت هر یک از سهامداران تنها به میزان سهمشان مسئولیت دارند.سرمایه اولیه برای تاسیس این نوع شرکت ده هزار یورو است.
2-مشارکت محدود بواسطه سهام
در این نوع شرکت دو یا بیشتر از دو نفر باید با یکدیگر متحد شوند.این نوع شراکت شباهت بسیاری به مشارکت محدود دارد که حداقل یک طرف باید مسئولین محدود و طرف دیگر باید عضو کلی باشد.
3-مشارکت محدود
شرط اصلی برای ایجاد این نوع مشارکت مانند مشارکت کلی است.حداقل یک طرف باید محدود شود با مسوولیت محدود و یک طرف کلی است با مسوولیت کامل برای تعهدات شرکت
4-طرفیت و مشارکت کلی
این نوع شرکت ایجاب می کند که حداقل دو یا شخص یا دو شخص حقوقی با یکدیگر جوینت شده و یک قراردادی برای فعالیت تحت نام یک شرکت امضا کنند.هیچ سرمایه اندکی هم مورد نیاز نیست.در این صورت که یک مشارکت کلی وجود دارد ،همه اعضا با مسوولیت کامل می باشند.

https://danasabt.ir/2023/09/17/%D8%A7%D8%AE%D8%B0-%DA%A9%D8%A7%D8%B1%D8%AA-%D8%A8%D8%A7%D8%B2%D8%B1%DA%AF%D8%A7%D9%86%DB%8C-%D9%81%D9%88%D8%B1%DB%8C/

5-تعاونی
این نوع از شرکت اساساَ برای تجارت های بزرگ طراحی شده است و حداقل دو سهامدار لازم است که باید 120 هزار یورو سرمایه اولیه فراهم کنند.سرمایه نیز به سهام تقسیم می شود که می تواند در بازار سهام اظهار شود.

آیا روکش دندان عصب کشی شده الزامی است؟

روش انجام عصب کشی دندان 

 به این صورت است که دندانپزشک ابتدا اطراف دندان را کاملا با سرنگ مخصوص بی حس می‌کند. ایمپلنت اقساطی در رشت سپس قسمت پوسیده دندان را برش می‌دهد تا پالپ دندان در معرض دید و دسترس قرار بگیرد. اگر پالپ و ریشه دندان عفونی شده باشد، عفونت را به طور کامل تخلیه می‌کند. پس از آن کانال ریشه دندان را به خوبی تمیز کرده و داخل کانال‌ها را با کمک فایل‌هایی پر می‌کند. اندازه فایل‌های انتخاب شده کاملا به کانال دندان بستگی دارد.

دندانپزشک معمولاً پس از آن دندان را به طور موقت پر می‌کند تا از ورود میکروب‌ها به ریشه دندان جلوگیری شود. اگر مشکلی برای بیمار پیش نیاید، پس از چند روز پانسمان را برمی دارد و دندان را با مواد دائمی پر می‌کند. از آنجایی که استحکام دندان‌های عصب کشی شده کمتر از دندان‌های دیگر است، روکش دندان عصب کشی شده پیشنهاد می‌شود. یکی از مهمترین مزایای استفاده از روکش دندان عصب کشی شده، افزایش استحکام دندان‌های ترمیم شده و همچنین ظاهر طبیعی دندان‌ها می‌باشد.

علائم پوسیدگی شدید دندان

پوسیدگی دندان در بیشتر مواقع به وضوح قابل مشاهده است. در این صورت بهتر است برای ترمیم پوسیدگی به دندانپزشک مراجعه کنید. اگر این پوسیدگی‌ها را ترمیم نکنید، پوسیدگی عمیق شده و ریشه دندان را درگیر می‌کند. با این حال، در برخی موارد، پوسیدگی ممکن است از کنار دندان‌ها شروع شود و شما نتوانید به موقع آن را تشخیص دهید. در این صورت با دیدن هر یک از علائم زیر به دندانپزشک مراجعه کنید. زیرا این موارد از علائم اصلی پوسیدگی دندان و آسیب به پالپ هستند.

  • حساسیت دندان به غذاهای سرد و گرم یکی از اولین علائم آسیب ریشه است.
  • وقتی غذای سفت می‌جوید دچار دندان درد شدید و گزنده می‌شوید.
  • دندان درد مداوم و غیر قابل تحمل دارید.
  • پوسیدگی دندان را روی سطح دندان مشاهده می‌کنید.
  • لثه‌های شما متورم شده است.
  • رنگ دندان تیره تر از دندان‌های دیگر است.
  • تورم روی گونه و کنار دندان آسیب دیده زیاد است.

روکش دندان عصب کشی شده 

طبق گفته انجمن دندانپزشکی آمریکا، روکش، کلاهکی است که دندانپزشک شما روی دندان‌های عصب کشی شده قرار می‌دهد.

روکش دندان عصب کشی شده، دندان آسیب دیده یا از دست رفته را به شکل، اندازه و عملکرد طبیعی خود باز می‌گرداند. روکش می‌تواند از دندان محافظت کند و ظاهر آن را بهبود بخشد.

در چه مواردی نیاز به روکش داریم؟

  • هنگامی که ساختار دندان طبیعی بعد از عصب کشی به اندازه کافی باقی نمانده باشد.
  • دندانی که پرکنندگی بزرگ و وسیعی دارد.
  • از یک دندان ضعیف در برابر شکستگی محافظت می‌کند.
  • پس از ترمیم دندان شکسته سپس روکش نیاز است.
  • دندان بدشکل یا بد رنگ را با روکش، کاور می‌کنند.
  • اگر ایمپلنت دندان دارید می‌توانید با روکش آن را بپوشانید.

روکش دندان از چه چیزی ساخته شده است؟

روکش‌ها را می‌توان از مواد مختلفی ساخت. آلیاژهای فلزی، سرامیک، چینی، پرسلن یا رزین کامپوزیت از این مواد هستند. هنگامی که روکش دندان عصب کشی شده را می‌سازند معمولا با رنگ دندان‌های طبیعی مطابقت دارد. زیرا باید با دندان‌های طبیعی شما ترکیب شوند.

برای انتخاب جنس روکش دندان باید به چه مواردی توجه کنید؟

در زمان انتخاب جنس روکش دندان عصب کشی شده حتما می‌خواهید روکش، طبیعی به نظر برسد؟! برای اینکه تصمیم بگیرید از کدام ماده برای روکش استفاده کنید، دندانپزشکتان فاکتورهای زیادی را در نظر می‌گیرد تا مطمئن شود جنس روکش انتخاب شده استحکام کافی را دارد.

  • مکان و عملکرد دندان
  • موقعیت بافت لثه
  • تعداد دندانی‌ها دیده شده هنگام لبخند زدن 
  • رنگ یا سایه دندان‌های اطراف
  • بررسی هزینه‌ها و بیمه 

مراحل قرار دادن روکش دندان عصب کشی شده

معمولاً برای تکمیل درمان به دو ویزیت دندانپزشکی نیاز دارید. تا روکش روی دندان طبیعی قرار بگیرد، چندین مرحله نیاز دارد: 

  1. دندانپزشک دندان را با برداشتن قسمت بیرونی، از هرگونه پوسیدگی پاک می‌کند تا دندان آماده روکش مناسب شود. اگر ساختار دندان برای گذاشتن روکش کافی نباشد، دندانپزشک ممکن است هسته دندان را آماده سازی کند تا تحمل روکش را داشته باشد.
  2. از دندان شما قالب گیری می‌شود. ساختار دندانی را می‌توان با قالب یا با اسکن دیجیتالی بدست آورد. 
  3. برای محافظت از دندان در حین ساخت روکش دائمی، یک روکش موقت قرار داده می‌شود. ساخت تاج دائمی معمولا کمتر از ۲ هفته طول می‌کشد. در حالی که روکش موقت دارید، ممکن است دندان به گرما و سرما حساس باشد. در این مدت از جویدن آدامس و خوردن غذاهای چسبناک خودداری کنید. اگر دندانپزشک شما تجهیزات خاصی دارد، ممکن است بتوانید تاج دائمی را در همان روز برای شما ساخته و جایگذاری کنند.
  4. هنگامی که روکش دائمی آماده شد، دندانپزشک آن را در دهان شما قرار داده و تنظیمات لازم را انجام می‌دهد. وقتی شما و دندانپزشکتان از ظاهر و احساس آن راضی بودید، روکش در جای خود محکم می‌شود.

مراقبت‌های قبل و بعد جایگذاری روکش دندان عصب کشی شده

قبل از آنکه روکش روی دندان قرار بگیر ابتدا آن را عصب کشی و پر می‌کنند. در این شرایط دندان آمادگی کامل برای قرار گرفتن روکش را دارد. 

بعد از گذاشتن روکش دندان عصب کشی شده، باید مراقبت از دندان‌ها را دقیقا مانند دندان‌های طبیعی انجام دهید. روکش‌ها ممکن است بشکنند. دندان زیر روکش نیز همچنان می‌تواند دچار پوسیدگی و حفره شوند. 

اقدامات لازم برای جلوگیری از پوسیدگی یا آسیب به روکش دندان

  • دندان‌های خود را دو بار در روز با خمیر دندان حاوی فلوراید مسواک بزنید و هر روز بین دندان‌های خود را تمیز کنید. به دنبال محصولات مراقبت از دهان باشید که دارای مهر پذیرش انجمن دندانپزشکی آمریکا و سیب سلامت ایران هستند. 
  • از جویدن غذاهای سفت، یخ یا سایر اجسام سفت مانند مداد خودداری کنید.
  • برای معاینات منظم و تمیز کردن حرفه ای دندان‌ها حتما به دندانپزشک مراجعه کنید.

آیا می‌توانیم بعد از عصب کشی روکش نگذاریم؟

اغلب به دلیل عصب کشی و خالی شدن زیاد دندان‌ها، دندانپزشک توصیه می‌کند روکش دندان عصب کشی شده حتما انجام شود. اما در برخی موارد دندانپزشک لزومی به انجام این کار نمی بیند. اگر دندان‌های جلویی عصب کشی شوند به دلیل آنکه زیاد تحت فشار نیستند لزومی به کشیدن روکش روی آنها نداریم. تنها لازم است با ماده ای همرنگ دندان پر شوند. اما اگر در طی سال‌ها این دندان‌ها نیز تیره تر شدند امکان روکش کشیدن وجود دارد. می‌توانید با روکش زیبایی را به دندان خود برگردانید. 

مشکلات روکش دندان بعد از عصب کشی

همه ما می‌دانیم که روکش دندان برای حفظ سلامت دندان‌ها موثر است. روکش دندان عصب کشی شده برای افزایش طول عمر دندان طبیعی اهمیت زیادی دارد. اما با این وجود باز هم دندان به کیفیت سابق خود باز نخواهد گشت.

 مشکلاتی مانند پرداخت هزینه زیاد برای ساخت روکش یا تراشیدن مینای دندان در زمان گذاشتن روکش از مواردی است که باید قبل از انتخاب روکش به آن توجه نمایید. برای آنکه مینای دندان زیاد تراشیده نشود باید دندانپزشک شما مهارت و تجربه کافی را داشته باشد. زیرا مینا هیچگاه دوباره جایگزین و ترمیم نمی شود. 

آماده سازی ژل آگارز

ژل الکتروفورز آگارز

آگارز پلی ساکاریدی است که اغلب از نوعی جلبک قرمز دریایی استخراج می شود. کوره ازمایشگاهی آگارز در جداسازی ماکرومولکول ها و سوپر مولکول ها مورد استفاده قرار می گیرد. آگارز همانند پودر سفیدرنگی  است که اگر  به آن آب جوش اضافه شود پس از گذشت زمان و سرد شدن ، حالت ژله ای به خود می گیرد. از ژل الکتروفورز آگارز برای تفکیک نوکلئیک اسیدها استفاده می کنند. تهیه ژل آگارز سریع تر و آسان تر از ژل پلی اکریل آمید است  و هزینه کمتری برای این منظور صرف می شود.

مراحل تهیه ژل آگارز

جهت آماده سازی ژل آگارز (agarose gel) طبق مراحل زیر پیش می رویم:

  1.  آماده سازی قالب ژل.
  2. قرار گیری شانه ای با دنده های مناسب  بر روی قالب.
  3. حجم ژل مورد نظر تعیین شود(اندازه گیری طول و عرض قالب و قطر ژل مورد نظر)
  4. پودر آگارز وزن شود.
  5. آگارز در بافر حل شود و سپس حرارت داده  شود تا  به خوبی بجوشد و قبل از خنک شدن به ازای هر ۱۰ میلی لیتر ژل یک میکرولیتر از محلول اتیدیوم بروماید به آن اضافه شود و در آخر در داخل قالب ریخته شود.
  6. بعد از بسته شدن، ژل را از قالب خارج کرده و داخل تانک الکتروفورز قرار داده شود.

این امکان وجود دارد که ژل الکتروفورز آگارز را با حل کردن پودر آگارز در بافر TAE یا TBE آماده کرد. ابتدا باید پودر آگارز در بافر مورد  نظر حل شود و تا دمای جوش گرم شود، اما نباید  بجوشد، پس از آن مدتی صبر کنید تا آگارز ذوب شده سرد شود.

  قبل از ریخته شدن آگارز ذوب شده شانه در تری قرار داده شود تا به خوبی چاهک های مخصوص قرار گیری نمونه تشکیل بشوند. غلظت ژل 1 درصد معمولا برای یک عمل الکتروفورز روتین تهیه می شود.

هنگامی که ژل آماده شد، شانه را از آن بیرون بیاورید و  پس از  قرار دادن آن در محفظه تانک و ریختن بافر تازه نمونه ها را داخلش بارگذاری کنید.  بهتر است نمونه ها را  با بافر  Loading  مخلوط کنید تا به راحتی در چاهک ها قرار بگیرند. بافر Loading دارای رنگ هایی مثل، بروموفنول بلو و زایلن سیانول است که این رنگ ها برای نشان دادن میزان پیشرفت نمونه ها بر روی ژل مورد استفاده قرار می گیرند. حال فرصت آن است که نمونه هایDNA  با استفاده از سمپلر بارگذاری شوند.

هرچه ولتاژ بالاتر  باشد جداسازی نمونه ها سریع تر انجام می شود، اما ولتاژ بسیار بالا نیز سبب ذوب شدن ژل و بافر می شود و دلیلی می شود بر این که جداسازی نمونه ها با کیفیت خوبی صورت نگیرد. ولتاژ پایین هم موجب پهن شدن باندها برای قطعات کوچک DNA  می شود.

به منظور مشاهده راحت مولکول DNA  در نور، همراه آن ها رنگ هایی نیز بارگذاری می شود مثلا زایلن سیانول که آبی کم رنگ است برای مولکول های بزرگ DNA مناسب است  و بروموفنل بلو که به رنگ آبی تیره است برای مولکول های کوچک تر DNA مناسب است.

نحوه ساخت هود لامینار

 هود لامینار که هود میکروبی نیز نامیده می شود، ساخت و نصب سکوبندی ازمایشگاهی هودی است که از آن  در آزمایشگاه ها به منظور جلوگیری از آلوده شدن افراد و پرسنل آزمایشگاه به وسیله آیروسل ها و ذرات آلوده معلق در هوا استفاده می کنند. 

کلاس بندی هود لامینار به 3 نوع هود کلاس 1 و 2 و 3 تقسیم می شود که تفاوت آن ها در قدرت و نحوه مقابله آن ها با پخش شدن ذرات آلوده است ، به عنوان مثال هود کلاس 1فقط از پرسنل و محیط آزمایشگاه  در برابر آلودگی حفاظت می کند ولی در هود کلاس 2 و3 علاوه بر حفاظت از پرسنل و محیط آزمایشگاه از میکروارگانیسم مورد مطالعه نیز در برابر آلودگی حفاظت صورت می ­گیرد .

سرعت جریان هوا در هود لامینار بین ۰.۳ تا ۰.۵ متر بر ثانیه است و جریان هوا در این نوع هود یا به صورت افقی و یا به صورت عمودی است . در نوع افقی ، هوای تصفیه شده از پشت دمیده شده و به قسمت جلوی محل کار حرکت می کند . در یک نوع عمودی ، هوا از بالا بر روی منطقه کار دمیده می شود و از طریق پایه به بیرون حرکت می کند .

اجزای تشکیل دهنده هود لامینار

از اجزای این هود می توان به فیلترهای هود لامینار  و موارد زیر را اشاره کرد:

  • فیلتر هپا HEPA
  • فیلتر (ULPA)
  • شیر گاز
  • در شیشه ای محافظ
  • لامپ UV
  • فن آکسیال و یا فن سانتریفیوژ
  • لامپ  برای روشنایی فضای آزمایش
  • پریز دربدار
  • مجهز به برد الکترونیکی

ویژگی های هود لامینار

  • ابعاد داخلی هود : عرض های ۷۸ و ۹۸ و ۱۱۸ و   ارتفاع های ۷۵ و ۱۰۵ سانتی متر .
  • ابعاد خارجی هود : عرض های ۸۰ و ۱۰۰ و ۱۲۰ و ارتفاع های ۱۸۰ و ۲۱۰ سانتی متر .
  • جنس: اسکلت آن از جنس پروفیل  با پوشش رنگ الکتروستاتیک و جنس کفه هود سرامیک ضد اسید یا سنگ گرانیت  و یا ورق استیل است .
  • دارای درب شیشه ای به ضخامت 6 میلی متر از جنس پلکسی گلاس همراه با وزنه تعادلی .

    نحوه ساخت هود لامینار

    برای ساخت هود لامینار نیاز به فیلتر هپا H13 اصلی بسته به اندازه دستگاه معمولا ۳۰ در ۸۰ سانتیمتر و اگزاست با سایز ۱۵ در ۱۵ سانتیمتر و فن سانتریفیوژ ۲۸۰۰ دور و لامپ یووی تایپ سی و یک عدد تایمر برای لامپ یووی و یک عدد کانتر برای شمارش عمر فیلتر هپا نیاز دارید. پس از تهیه این موارد شما باید یک باکس بسازید .

    ساخت باکس فلزی جهت هود لامینار کلاس ۲

    یک باکس فلزی شامل درب اصلی شیشه ای ریلی برای حفاظت از محیط بیرون و درون می باشد در عین حال باکس دستگاه فلزی به صورت دو جداره ساخته می شود، چراکه جریان هوا به صورت سیرکولاسیون می باشد و باید هوای داخل دستگاه مجددا تصفیه شود.


    عبور جریان هوا به نقاطی تقسیم می شود. نقطه ۱ محل ورود هوای تازه و ۶ نقطه خروج هوای کهنه از هود لامینار با عبور از فیلتر هپا می باشد. در نقطه ۱ هوا در منطقه فشار منفی سریعا وارد منطقه ۳ می شود و با محصول برخوردی ندارد.

    منطقه ۲ منطقه مهم و محل کار می باشد که هوای آن همیشه هوای تصفیه شده و عاری از میکروارگانیسم ها می باشد. و منطقه بین ۵ و ۲ را تماما فیلتر هپا پر کرده است تا هوای آلوده منطقه ۵ که از محل منطقه ۳ تامین شده و ۴ آنرا هدایت کرده را به هوای پاک منطقه ۲ تبدیل کند.

    تا اینجا با گردش جریان هود لامینار آشنا شدیم. در ادامه تجهیزات ساده ای باید روی هود نصب شود.

    ساخت هود لامینار کلاس ۲

    • فن را در میان منطقه ۴و ۵ نصب کنید.
    • در نصب فیلتر باید دقت کنید، آسیبی متوجه کاغذ فیلتر نباشد، چرا که فیلتر هپا بسیار راحت آسیب می بیند و در دمای بالای ۷۰ درجه سلسیوس نیز آسیب می بیند و در دمای ۹۰ درجه ذوب می شود.
    • بین فیلتر هپا و باکس را باید با چسب آکواریوم پر کنید تا هوا نشت نکند.
    • تمام درز های باکس منطقه ۵ را با چسب کاملا سیل کنید. چراکه منطقه فشار مثبت است و می تواند آلودگی از منافذ به محل حساس ۲ نشر پیدا کند.
    • برای سنجش عمر فیلتر، کافیست تا یک کانتر و شمارنده ساعت عمر را با مدار فن سری کنید.
    • لامپ یو وی و روشنایی داخلی را در منطقه ۲ نزدیک به فیلتر هپا نصب کنید.
    • تایمر لامپ یووی برای تنظیم تایم کارکرد لامپ یووی را در سر مدار لامپ یووی متصل کنید.

    نکات مهم ساخت هود لامینار کلاس ۲

    • لامپ یووی را از تایپ سی جهت میکروب کشی تهیه کنید.
    • در عین حال در نظر داشته باشید که در فضای بین ۲ و ۳  صفحه ای مشبک که برش لیزر خورده و از جنس استیل ۳۰۴ می باشد، قرار دهید.
    • پریز برق داخلی هود نیز موردی است که نباید نادیده گرفته شود و باید ابتدای کار به آن فکر کنید.
    • فیوز برای حفاظت از دستگاه و کاربر را نیز در نظر بگیرید.
    • با مراحل فوق ما می توانیم یک هود لامینار را برای آزمایشگاه خود بسازیم.

    کنترل کیفی هود لامینار

    هود لامینار از لحاظ تست پارتیکل و شدت نور یووی و روشنایی داخلی و سرعت جریان هوا کنترل می شوند.

    مهمترین تست برای دستگاه هود لامینار، تست پارتیکل است، که باید اطراف فیلتر به نحوی سیل شده باشد که به هیچ وجه نشتی پارتیکل نداشته باشیم. و در کنار آن باید حواسمان باشد در حمل و نقل فیلتر هپا آسیب ندیده باشد، اگر آسیبی روی فیلتر احساس می کنید، حتما آن محل را با چسب مسدود کنید.

    فیلتر های هپای استاندارد تماما در قابی قرار دارند که دور تا دور آنرا رزین پر کرده است تا هیچ نشتی پارتیکل رخ ندهد.